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鸡流行性乙型脑炎抗体IgG ELISA试剂盒操作步骤

发布时间:2020-12-28   点击次数:68次

鸡流行性乙型脑炎抗体IgG ELISA试剂盒操作步骤:

1.   使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2.   根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3.   加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。

4.   甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5.   每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6.   甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7.   每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。

8.   取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9.   在450nm波长处测定各孔的OD值。

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