欢迎来到上海谷研实业有限公司
咨询热线:021-39921927
技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 >难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒反应五要素

难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒反应五要素

更新时间:2021-01-19   点击次数:924次

难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖激酶(GCK)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA检测试剂盒
人葡萄糖-6-磷酸酶/葡萄糖-6-磷酸酯酶(G-6-Pase)ELISA检测试剂盒
人破伤风(Tetanus)抗体(IgG)ELISA检测试剂盒
人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA检测试剂盒
人平滑肌肌动蛋白(SMA)ELISA检测试剂盒
人嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)ELISA检测试剂盒
人脾脏酪氨酸激酶(Syk)ELISA检测试剂盒
人皮质抑素/皮质醇稳定蛋白(CORT)ELISA检测试剂盒
人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA检测试剂盒
人皮质素-3(Cortxin-3)ELISA检测试剂盒
人皮质类固醇结合球蛋白(CBG)ELISA检测试剂盒
人皮质醇(Cortisol)ELISA检测试剂盒
人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)ELISA检测试剂盒
人皮肤蛋白(DPT)ELISA检测试剂盒
人皮动蛋白(CTTN)ELISA检测试剂盒
人泡状过表达癌症促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA检测试剂盒
人排序连接蛋白3(SNX3)ELISA检测试剂盒
人偶联因子6(CF6)ELISA检测试剂盒
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA检测试剂盒
人牛奶过敏原特异性IgE抗体ELISA检测试剂盒
人牛儿基焦磷酸合酶(GGPS1)ELISA检测试剂盒