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肾上腺皮质抗体elisa试剂盒样品收集及保存方法

发布时间:2021-02-24   点击次数:37次
  肾上腺皮质抗体elisa试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验,往预先包被人促肾上腺皮质激素捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
       用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人促肾上腺皮质激素呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,计算样品浓度。
  一、样品收集、处理及保存方法
  1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
  3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
  5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
  二、血清样本
  分离管分离血清。在1000 g离心之前,使血样凝集30分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或者分装,-20°C以下贮存
  三、血浆样本
  肝素抗凝收集血浆样本。1000g离心30分钟收集样本。即刻检测,或分装,-20°C以下贮存,根据标准品和待测样本的数量,用1x检测缓冲液按1:100 稀释浓缩的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。使用高浓度标准品做1:1系列稀释。每次移液时,请确保充分混匀。肾上腺皮质抗体elisa试剂盒以标准品稀释液作为标准曲线的零浓度。
 
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