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小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒操作步骤

发布时间:2021-08-25   点击次数:63次

小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒操作步骤:


1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。


2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。


4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。


5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。


6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。


7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 


8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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