猪补体因子H（CFH）ELISA试剂盒​操作步骤

猪补体因子H(CFH)ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体

转化生长因子β诱导蛋白3抗体（半胱氨酸和丝氨酸富含核蛋白1）

有丝分裂激酶A/B/C抗体

蛋白酪氨酸激酶ATK抗体

长链脂肪酸辅酶A连接酶1/2抗体

过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶2抗体

胆固醇酰基转移酶1抗体

磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体

磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体

磷酸化有丝分裂激酶B/C抗体

磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体

磷酸化肾上腺素能受体β2抗体

APS抗体

激活素受体样激酶1抗体

激活素A受体1B抗体

磷酸化雄激素受体抗体

磷酸化A-Raf抗体

酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体

脂肪细胞特异性粘附分子抗体

腺相关病毒5抗体

腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗体

腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体

磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体

细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体