染料法荧光定量PCR检测试剂盒使用时的注意事项

　　染料法荧光定量PCR检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。

　　染料法荧光定量PCR检测试剂盒注意事项：

　　1、初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

　　2、所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。

　　3、操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。

　　4、样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。

　　5、试剂盒里所有物品应视为污染物对待。

　　染料法荧光定量PCR检测试剂盒的实验规则：

　　1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。

　　2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。

　　3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。

　　4、实验时，要使底物避光保存。

　　5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。

　　6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

　　7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。

　　8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

　　9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。