TRelisa试剂盒的检测程序及其实验规则介绍
更新时间:2022-11-10 点击次数:385次
TRelisa试剂盒定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间,及时判断,底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高,底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。
TRelisa试剂盒检测程序:
1、加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
2、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。
3、每孔中加入抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
4、洗板:同前。
5、每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
6、洗板:同前。
7、每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。
8、每孔加入100ul终止液混匀。
9、30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
TRelisa试剂盒实验规则:
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。