基质裂解素elisa试剂盒的操作流程及结果分析
更新时间：2023-04-18 点击次数：301次
基质裂解素elisa试剂盒的标准曲线是通过制备一系列不同浓度的质点进行测定，将测得的OD值代入直线回归公式，求出质点浓度。通过在已知标准曲线上测定未知样品相应的OD值，借助直线回归方程求出未知样品的质量浓度。用于定量测量各种动物的血清、血浆、尿液、富集的细胞上清、支原体分泌物等样品中基质金属蛋白酶1（MMP1）,基质金属蛋白酶2（MMP2）,基质金属蛋白酶3（MMP3）,基质金属蛋白酶8（MMP8）,基质金属蛋白酶9（MMP9）,基质金属蛋白酶12（MMP12）,基质金属蛋白酶13（MMP13）的含量。
基质裂解素elisa试剂盒成分
1、多孔板：12个孔，每个孔为96孔板，生产质量合格的96孔板。
2、标准品：共包括7个含不同MMPs浓度的标准品，7ml/瓶。
3、探针：生产质量合格的酶标记抗体（HRP标记）。
4、1×样缓冲液：将样品与试剂盒中的样品稀释液的体积比稀释1倍。
5、1×探针稀释液：探针稀释液体积为探针体积的10倍，在试验前将探针稀释液稀释10倍。
6、1×洗涤缓冲液：是一种高效洗涤剂，含有一种P20防腐剂，pH值为6.8±0.1。
7、TMB染色剂：10ml/瓶，直接用于添加到孔中，产生传统的蓝色反应。
8、1M止反应液：止反应液用于停止酶反应。
操作流程
1、将标准品和未知样品加入多孔板，按装好所需试剂。
2、盖上透明胶薄膜板，震荡孔板，反复轻扣或振荡孔板，让混合物充分混合。
3、孔板放置于37℃的恒温水浴中几分钟，待平衡。
4、废液，洗板2~3次。洗涤后反转孔板，用头部轻轻拍打吸干孔内液体。
5、使用适当稀释的探针在37℃下冷却约10分钟。
6、废液，洗板3~4次。洗涤后反转孔板，用头部轻轻拍打吸干孔内液体。
7、加入遮光板,获取信号准确度。
8、再次使用洗涤缓冲液洗板，及其余操作前一样。
9、加入TMB染色剂，在黑暗中孵育20~25分钟。
10、加入止反应液后，在ELISA阅读器中测量OD值。
基质裂解素elisa试剂盒结果分析
将测量得到的OD值，按照标准曲线转化为物质的质量浓度。根据检测的样品类型和检测不同的MMPs，确定不同的临界值。如果检测值高于临界值则可判断存在MMPs异常水平，从而评估疾病的程度以及病情恢复情况。
