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植物维生素D2(VD2)ELISA免费代测试剂盒技术参数

发布时间:2021/1/8   点击次数:40
 
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植物维生素D2(VD2)ELISA免费代测试剂盒说明书

【中文名称】:植物维生素D2(VD2)ELISA免费代测试剂盒
【产品规格】:96T/48T。
【保存条件】:2-8℃低温保存
【保质期】:6个月,所有试剂盒均提供批次。
【试剂盒成分】:酶标板,试剂,标准品等。ELISA试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。 主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
植物维生素D2(VD2)ELISA免费代测试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中维生素C(VC)水平。用纯化的维生素C(VC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入维生素C(VC),再与HRP标记的维生素C(VC)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素C(VC)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中维生素C(VC)浓度。 
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样本处理及要求

1.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

3. 不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。

4.温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

7.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

8.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

9.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔di一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 试剂盒2-8℃冷藏,保质期6个月。

 
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