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开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒实验原理

发布时间:2021/1/22   点击次数:81
 
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开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

概述:

荧光定量PCR的基本原理就是在PCR扩增过程中,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。本公司根据您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探针法。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现基因的相对定量、定量和定性分析。
PCR实验方法步骤:

方法:

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。

3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒注意事项:

1.基础程序;

2.扩增温度和延伸温度;

3.反应时间;

4.循环次数;

5.PCR 反应液的配制;

6.PCR技术的基本原理;

7.PCR的反应动力学;

8.PCR扩增产物;

9.PCR反应体系与反应条件。点击了解更公司产品。
开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒荧光定量PCR服务:

简介:实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。

1、荧光定量PCR服务要求:

(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。

(02)请提供已知的全长基因序列。

(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等

2、开心果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒荧光定量PCR操作程序

(01)引物(探针)设计与合成。

(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。

(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。

(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。

3、荧光定量PCR的收费标准:

  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

 
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