基因检测试剂盒的使用说明

　　基因检测试剂盒是一种用于β-半乳糖苷酶报告基因检测的试剂盒，β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，经常与荧光素酶报告基因一起转染细胞，被用作荧光素酶报告基因检测的内参照，从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。

　　的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒，是以无色的ONPG为底物，在β-半乳糖苷酶的催化下生成，然后通过酶标仪或分光光度计在420nm波长附近测定吸光度，从而实现对β-半乳糖苷酶活性的测定。本试剂盒所提供的裂解液适合于动物细胞的裂解，通常不适合于细菌、真菌和植物细胞的裂解。

　　使用说明：

　　1、细胞裂解后可以立即测定β-半乳糖苷酶活性，也可以先冻存，待以后再测定。冻存的样品需融解，并达到室温后才可以开始测定。建议使用12、24或48孔板进行报告基因检测。

　　2、充分融解β-半乳糖苷酶反应终止液，如有难溶结晶，请在37℃水浴溶解。

　　3. 在96孔板中，分别加入5-50微升样品，然后加入报告基因裂解液至50微升。由于不同的细胞体系，不同的转染方法的转染效率相差很大。

　　4. 在每个孔中加入β-半乳糖苷酶检测试剂50微升，混合后，盖上96孔板的盖子。可以用保鲜膜封住96孔板防止蒸发，在37℃放置30分钟或直至样品孔内出现浅黄色，通常大约3小时后，吸光度达到平台，孵育更长时间吸光度不会明显升高。

　　5. 加入半乳糖苷酶反应终止液终止反应，混匀，尽量避免气泡。

　　6. 按仪器操作说明书开启酶标仪或分光光度计，将测定波长设定为420nm，测定吸光度。