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PCR荧光定量检测试剂盒使您的实验结果更准确

发布时间:2020-12-20   点击次数:91次
  PCR荧光定量检测试剂盒利用荧光信号实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性,该技术已被广泛用于检测细胞mRNA 表达量的变化;比较不同组织的表达差异,验证基因芯片,干扰的实验结果等。
  荧光染料是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光。它的优点就是可以与任意引物、模板相配合,用于任意反应体系中。从经济角度考虑,它也比其它的探针的价格要便宜得多,但由于它能与所有的双链DNA结合,所以一旦反应体系中出现非特异扩增,那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素,可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特异性影响。
  PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
  PCR荧光定量检测试剂盒灵敏度更高,稳定性强,对PCR抑制性小,适合HRM分析,除预混体系外,一步法和两步法试剂盒让您加速实验进程,一站式完成实验,相应试剂可校正孔间差异,使您的实验结果更准确。
  定量分析包括定量分析和相对定量分析,前者可以得到某个样本中基因的拷贝数和浓度,后者可以对不同方式处理的两个样本中基因表达水平进行比较。除此之外,我们还可以对PCR产物或样品进行定性分析,例如:利用熔解曲线分析识别扩增产物和引物二聚体,以区分非特异扩增;利用特异性探针进行基因型分析及SNP检测等。目前实时荧光PCR技术已经被广泛应用于基础科学研究﹑临床诊断﹑疾病研究及药物研发等领域。
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