基质裂解素elisa试剂盒的使用要注意哪些问题？

　　基质裂解素elisa试剂盒用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过洗涤后用底物TMB显色。

　　在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色，颜色的深浅和样品中的C3呈正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻，保存过程中如出现沉淀，应再次离心，血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤，不要在37℃或更高的温度加热解冻，应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    基质裂解素elisa试剂盒的使用要注意的问题

　　1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

　　2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

　　3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

　　4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　5）每孔加入80ul的亲和链酶素，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

　　基质裂解素elisa试剂盒测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象，因此该体系常被称为酶放大体系。