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LAMP试剂盒提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因

发布时间:2022-08-25   点击次数:129次
  LAMP试剂盒可以用于LAMP等温扩增,LAMP即Loop-MediatedIsothermalAmplification(环介导等温扩增),是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。
  LAMP试剂盒具有下列特点:
  1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比PCR更高。
  2.高扩增效率,扩增效率可达到109-1010,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的DNA分子。
  3.65℃左右等温扩增,不需要贵重的热循环仪。
  4.即开即用,包含了除引物和模板DNA外的所有成份,十分方便。
  5.肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
  6.提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
  LAMP试剂盒DNA纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切酶不受RNA或单链DNA的影响。当微量的污染物进入限制性内切酶贮存液中时,会影响其进一步使用,因此在吸取限制性内切酶时,每次都要用新的吸管头。如果采用两种限制性内切酶,必须要注意分别提供各自的最适盐浓度。若两者可用同一缓冲液,则可同时水解。若需要不同的盐浓度,则低盐浓度的限制性内切酶必须首先使用,随后调节盐浓度,再用高盐浓度的限制性内切酶水解。
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