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肾上腺皮质抗体elisa试剂盒的作用原理

发布时间:2022-10-25   点击次数:61次
  肾上腺皮质抗体elisa试剂盒TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后,约40分钟显色达,随即逐渐减弱,至2小时后即可*消退至无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和SDS等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
  肾上腺皮质抗体elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法:
  1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
  3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
  5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
  肾上腺皮质抗体elisa试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验,往预先包被人促肾上腺皮质激素捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人促肾上腺皮质激素呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,计算样品浓度。
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