基质裂解素ELISA试剂盒的具体操作步骤
更新时间：2023-11-26 点击次数：183次
基质裂解素ELISA试剂盒是一种用于测定样品中基质裂解素浓度的试剂盒。采用双抗体夹心法原理，通过特异性抗体与基质裂解素结合，然后加入酶标二抗，形成抗原-抗体-酶标二抗的复合物。加入底物和终止液，使酶催化底物产生颜色反应，根据颜色的深浅来推算样品中基质裂解素的浓度。
1.特异性抗体：用于识别和结合基质裂解素的抗体，通常为鼠源或兔源单克隆抗体。
2.酶标二抗：与特异性抗体结合的酶标记的二抗，常用的酶有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
3.底物：与酶发生反应产生颜色的物质，如四甲基联苯胺（TMB）等。
4.终止液：用于终止颜色反应的溶液，如硫酸等。
5.标准品：用于制作标准曲线的标准基质裂解素溶液。
6.其他辅助试剂：如洗涤液、稀释液等。
基质裂解素ELISA试剂盒的操作步骤如下：
1.将待测样品进行适当的稀释，使其基质裂解素浓度在试剂盒的检测范围内。
2.将标准品、待测样品和空白对照分别加入到相应的微孔板中，每孔加入一定量的特异性抗体，孵育一段时间，使抗体与基质裂解素充分结合。
3.弃去孔内液体，用洗涤液洗涤孔内残留物，重复洗涤几次。
4.每孔加入一定量的酶标二抗，孵育一段时间，使二抗与特异性抗体结合。
5.弃去孔内液体，用洗涤液洗涤孔内残留物，重复洗涤几次。
6.每孔加入底物，孵育一段时间，使底物与酶发生反应产生颜色。
7.加入终止液，使颜色反应停止。
8.用酶标仪测定各孔的光密度值（OD值），根据标准曲线计算出待测样品中基质裂解素的浓度。
