禽轮状病毒A组RT-LAMP试剂盒

产品优势：
1.随时可用。
2.优化的缓冲液可增强特异性并减少引物二聚体的形成。
3.高灵敏度，特异性和可靠性。
4.为不同的qPCR仪器提供了被动参考染料。

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DN段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

 Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) 大鼠脑源性神经营养因子PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) 大鼠脑源性神经营养因子染料法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) 大鼠脑源性神经营养因子探针法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Intraflagellar Transport Protein 20（IFT20） 纤毛内转运蛋白20染料法荧光定量PCR试剂盒  其他特定基因检测/定做基因检测试剂盒  50次  低温  -20℃  一年
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Human proto oncogene HER2 / neu visualized lamp Kit 人原癌基因Her2/neu可视化LAMP试剂盒  其他特定基因检测  50次  低温  负20度  一年
Human proto oncogene HER2 / neu PCR kit 人原癌基因Her2/neu PCR试剂盒  其他特定基因检测  50次  低温  负20度  一年
Fluorescent quantitative PCR kit for human proto oncogene HER2 / neu 人原癌基因Her2/neu染料法荧光定量PCR试剂盒  其他特定基因检测  50次  低温  负20度  一年
Fluorescence quantitative PCR kit for human proto oncogene HER2 / neu probe 人原癌基因Her2/neu探针法荧光定量PCR试剂盒  其他特定基因检测  50次  低温  负20度  一年
Lamp kit for human X chromosome 人X染色体LAMP试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  -20℃  一年
Fluorescent quantitative PCR kit for human X chromosome 人X染色体染料法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  -20℃  一年
Human X-chromosome probe fluorescent quantitative PCR kit 人X染色体探针法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  -20℃  一年
Human X chromosome PCR kit 人X染色体PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  -20℃  一年
Lamp kit for human GAPDH Gene 人GAPDH基因LAMP试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
Human GAPDH Gene Probe fluorescent quantitative PCR kit 人GAPDH基因探针法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
Fluorescent quantitative PCR kit for human GAPDH Gene 人GAPDH基因染料法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
Human GAPDH Gene PCR kit 人GAPDH基因PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Human RNA Enzyme P Gene 人核糖核酸酶P基因LAMP试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Human RNA Enzyme P Gene 人核糖核酸酶P基因探针法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Human RNA Enzyme P Gene 人核糖核酸酶P基因染料法荧光定量PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
 Human RNA Enzyme P Gene 人核糖核酸酶P基因PCR试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年
Lamp kit for uidA gene uidA基因LAMP试剂盒  定做基因检测试剂盒  50次  低温  负20度  一年

A2AR/Adenosine A2a receptor  腺苷A2A受体抗体  0.1ml
AACT-Alpha1/A1ACT  α-1抗胰糜蛋白酶抗体  0.1ml
AAK1  AP2关联激酶1抗体  0.2ml
Cyp2-j3  细胞色素P450Ⅱj3抗体  0.2ml
OST-beta  有机溶质转运蛋白OSTβ抗体  0.2ml
AANAT  芳香胺N-乙酰化转移酶抗体  0.2ml
AT2R2  血管紧张素Ⅱ受体2抗体  0.2ml
Influenza A virus (Duck)  鸭流感病毒抗体  0.2ml
TNF-alpha  肿瘤坏死因子-α抗体  0.1ml
AARS2  丙氨酰tRNA合成酶2抗体  0.2ml
TDRD9/HIG1  缺氧诱导蛋白HIG1抗体  0.2ml
SIRT1/sirtuin 1  沉默调节蛋白1抗体  0.1ml
Spindly/CCDC99  亚砷盐相关蛋白抗体  0.2ml
TBX-5  转录因子Tbx5抗体  0.1ml
AAT/Tryptase  α-1抗胰蛋白酶抗体  0.1ml
AATK  AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体  0.2ml
NMP-22  核基质蛋白22  0.1ml
AATF  拮抗凋亡转录因子抗体  0.2ml
ABCA1/ABC1  腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体  0.1ml
禽轮状病毒A组RT-LAMP试剂盒ABCD1/CCL22  嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗体  0.1ml
ABCB5  ATP结合蛋白家族5抗体  0.1ml
ABCB6  ATP结合蛋白家族6抗体  0.1ml
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。