肺表面活性物质相关蛋白CELISA试剂盒

产品名称： 肺表面活性物质相关蛋白CELISA试剂盒
英文名称：Human SP-C ELISA Kit 
产品规格：96T/48T
保存条件：2-8℃
运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
肺表面活性物质相关蛋白CELISA试剂盒Human SP-C ELISA Kit 具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。公司产品品种齐全，质量可靠，拥有完善的售前 售中 售后服务体系。人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA试剂盒 48T/96T。

准备试剂与收集血样：
1.  收集标本：产品仅用于科研血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
下列是公司正在热销的产品：

R 1610(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2 HL-60(白血病原髓细胞)四溴荧光素钾盐(>85.0%(HPLC))质量规格：>85.0%(HPLC)Tetrabromofluorescein Potassium Salt
CL-0196RKO(人结肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2溶剂红 48(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein
TMEM25 Others Human 人 TMEM25 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,4,5,6-四氯荧光素质量规格：荧光染料3,4,5,6-Tetrachlorofluorescein
人脑膜细胞cDNAHMC cDNA赤藓红B(>95.0%(E))质量规格：>95.0%(E)Erythrosine B
BT-474细胞，人导管瘤细胞 转化的豚鼠胎体细胞,104C1细胞 甲状腺癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1ml4'-羟基苯偶氮基-4-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid Hydrate
人骨肉瘤细胞;HOSDMT保护性-2'-甲氧基尿苷DMT-2'-OMe-U质量规格：>98%,BR
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] T细胞白血病细胞，HuT78细胞 Mv.1.Lu(NBL-7)细胞，貂肺上皮细胞5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC质量规格：>98%,BR
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系 Human5’-DMT-2’-TBDMS-rU5’-DMT-2’-TBDMS-rU质量规格：>98%,BR
LCN1 Others Human 人 LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG质量规格：>98%,BR
胶质瘤组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1ml5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC质量规格：>98%,BR
人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2羧甲淀粉钠shēng huà shì jì容量：5克
CLEC6A Others Human 人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸激酶 Pyruvate Kinase from rabbit muscle 9001-59-6 1KU 通用试剂
C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells衣康醋;亚基琥珀醋;2-亚基丁二醋;分解屋头醋 Itcconic ccid;Propylqnqdiccrboxylic ccid 97-62-4
HSC1细胞，人色素瘤细胞 罗伊氏乳杆菌 人B细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1)3，5-二甲基-3-5克
WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞) 5×106cells/瓶×21121-60-42-;-2-; 2-; 2-醛基2-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-2-aldehyde; Picolinaldehyde; 2-Pyridyla dehyde; 2-Pyridinecarbaldehyde;

实验规则：

1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
肺表面活性物质相关蛋白CELISA试剂盒8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。