品牌 | 其他品牌 | CAS | 详见说明书 |
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分子式 | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
分子量 | 详见说明书 | 货号 | GOY-H7925 |
规格 | 48T/96T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 | 应用领域 | 化工 |
产品名称: 蛋白二硫化物异构酶A3ELISA试剂盒
英文名称:Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISA Kit
产品规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
蛋白二硫化物异构酶A3ELISA试剂盒Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISA Kit 具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。公司产品品种齐全,质量可靠,拥有完善的售前 售中 售后服务体系。人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)ELISA试剂盒 48T/96T。
准备试剂与收集血样:
1. 收集标本:产品仅用于科研血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
下列是公司正在热销的产品:
MDA-MB-157(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2醋酸德舍瑞林质量规格:>99%,BRDeslorelin Acetate
Anglne(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R067大鼠肾足突细胞*培养基100mL 人胚肾细胞-F克隆;293F去氨加压素;去氨压素质量规格:>98%,BR,醋酸盐形式Desmopressin Acetate
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Promocell C-26011 Renal Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 肾上皮细胞生长培养基套装 500mlN4-苯甲酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脱氧胞甘(DMT- Bz- dC)Bz-DMT-dC质量规格:>98%,BR
肝细胞培养基HMN6-苯甲酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧腺苷(DMT-dA-Bz)Bz-DMT-dA质量规格:>98%,BR
LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2'-联-4-勒皮啶2,2'-Bi-4-lepidine质量规格:
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]2,2'-联嘧啶(>95.0%(GC))2,2'-Bipyrimidyl质量规格:>95.0%(GC)
SUNE-1亚株13-9B细胞,人鼻咽癌细胞系 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3 clone A31细胞 CM-H063人肾皮层上皮细胞*培养基100mL2,2'-二辛可宁酸(>98.0%(HPLC))2,2'-Bicinchoninic Acid质量规格:>98.0%(HPLC)
SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人细胞裂解液 (阳性对照) LY2940680质量规格:>98%LY2940680
人滋养层绒毛细胞总RNAHVT NALY2886721 质量规格:>98,BACE1 inhibitorLY-2886721
小鼠神经皮质细胞(MN-c)(1×106)利尼伐尼;ABT869质量规格:>98%,VEGFR/PDGFR抑制剂 Linifanib (ABT-869)
家猫皮肤细胞;FCA-S1头孢匹林钠(标准品)质量规格:含量测定Cefapirin
小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32 小鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基 100mLL-赤-鞘氨醇(合成物)质量规格:美国进口L-erythro-Sphingosine (synthetic)
实验规则:
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
蛋白二硫化物异构酶A3ELISA试剂盒 2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
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