大内皮素ELISA试剂盒

准备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。产品仅用于科研
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
​4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

大内皮素ELISA试剂盒Human Big Endothelin,Big ET-1 ELISA Kit 具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。公司产品品种齐全，质量可靠，拥有完善的售前 售中 售后服务体系。人大内皮素(Big ET-1)ELISA试剂盒 48T/96T。
产品名称：大内皮素ELISA试剂盒　
英文名称：Human Big Endothelin,Big ET-1 ELISA Kit
产品规格：96T/48T
保存条件：2-8℃
运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。

检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

实验规则：

1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

下列是公司正在热销的产品：

LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哌酸（标准品）Pipemidic acid质量规格：供检查用

豹猫肺成纤维样细胞;LCL3盐酸氟奋乃静（标准品）FLUPHENAZINE HYDROCHLORIDE质量规格：供HPLC法含量测定用

SPC-A1细胞，人肺腺癌细胞 绿猴肾细胞,Vero细胞 CM-M034小鼠肝动脉内皮细胞*培养基100mL鸦胆子苦醇(标准品)(+)-Brusatol质量规格：HPLC>98%,标准品

Sf-9(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸哌唑嗪（标准品）Prazosin HCl质量规格：含量测定

NHEK.f-c 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)少年，单一来源 500,000cells 原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml7-羟基7-Hydroxycoumarin质量规格：≥97%,BR

J774A.1(小鼠单核巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 空肠弯曲杆菌13X分子筛(干燥剂用)Molecular sieves Type 13X质量规格：干燥剂用

肺癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1ml13X分子筛(3-5mm,球形)Molecular sieves Type 13X质量规格：3-5mm,球形

EGFL7 Others Human 人 EGFL7 / VE-statin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 13X分子筛(2-3mm,球形)Molecular sieves Type 13X质量规格：2-3mm,球形

人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82]3A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱)Molecular sieves, 3 Å质量规格：20-40目,气相、液相色谱柱

SW1353细胞，骨肉瘤细胞 人鼻咽癌细胞(低分化),CNE2细胞 CL-0265CAL-27(人舌鳞癌细胞)5×106cells/瓶×23A分子筛(40-60目,气相、液相色谱柱)Molecular sieves, 3 Å质量规格：40-60目,气相、液相色谱柱

16HBE细胞，人支气管上皮细胞 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞,TMNE细胞 CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2酸钾shēng huà shì jì容量：1克

U-87 MG(人神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×22，3-二基丁烷　标准品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq 1979/9/8

HVMF-c 人类绒毛间质成纤维细胞(HVMF) 500,000cells 肾系膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)碳酸铜shēng huà shì jì容量：RT5克

大内皮素ELISA试剂盒　​成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)dNTPMIX100mMSOLUTIONpH7.0dNTP混合溶液,100 mM , pH 7.0超级40 M897

PRELP Others Human 人 PRELP 人细胞裂解液 (阳性对照) 5680-80-8L-丝酸盐酸盐L-Serine metxyl ester xy7nochloride