α1防御素ELISA试剂盒

产品名称： α1防御素ELISA试剂盒
英文名称：Human DEFA1 ELISA kit 
产品规格：96T/48T
保存条件：2-8℃
运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
α1防御素ELISA试剂盒Human DEFA1 ELISA kit 具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。公司产品品种齐全，质量可靠，拥有完善的售前 售中 售后服务体系。人α1防御素(DEFA1)ELISA试剂盒 48T/96T。

准备试剂与收集血样：
1.  收集标本：产品仅用于科研血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。*，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
下列是公司正在热销的产品：

CM-M040小鼠肝窦内皮细胞*培养基100mL硫酸联氨(AR)质量规格：>99%,ARHydrazine sulfate

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 多酚氧化酶质量规格：>500 U/mg,BRPolyphenol Oxidase from Mushrooms

卵巢上皮细胞培养基OEpiCM甲霜灵标准溶液(100μg/ml,u=5%)质量规格：100μg/ml,u=5%Metalaxyl solution

MRC-5细胞，人正常胚肺成纤维细胞 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移),KP-N-NS细胞 人脉络丛成纤维细胞HCPF杀螟(标准品)质量规格：分析标准品Fenitrothion

猪细胞;ST矮壮素(标准品)质量规格：分析标准品 (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride

ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%)质量规格：10μg/ml,u=6%Hexythiazox solution

CL-0213SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)质量规格：100μg/ml,u=2%Imazalil solution

NCI-H446细胞，小细胞肺癌 人血液白血病细胞,TF-1细胞 人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1三氧化二铬(>99%，BR)质量规格：>99%，BRChromium (III) oxide

A549(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2四氧化三钴(>99%，BR)质量规格：>99%，BRCobalt (II, III ) oxide

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸钴四水(>99.5%,BR)质量规格：>99.5%,BRCobaltous acetate, tetrahydrate

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) 蒲公英萜醇；蒲公英赛醇(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Taraxerol

大鼠肺血管平滑肌细胞*培养基 100mL琥珀酸普卡必利质量规格：>98%,BRPrucalopride Succinate

C6/36细胞，蚊子细胞 A-704(人肾癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A盐酸纳洛酮质量规格：>98%,二水合物,1类受体拮抗剂Naloxone HCl dihydrate

NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD)硝酸布康唑质量规格：>98%,BRButoconazole nitrate

L-O2(人正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 角膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)阿巴卡韦5'-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Abacavir 5'-β-D-Glucuronide

实验规则：

α1防御素ELISA试剂盒1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。