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探针法荧光定量PCR检测试剂盒的特点和原理介绍

更新时间:2020-12-25   点击次数:511次
  探针法荧光定量PCR检测试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体,根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法,主要类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法等,可用于测定抗原,也可用于测定抗体,根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法,主要类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法等。
  一、需要自备的器材:
  1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器。
  2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水。
  3.处理的灭菌离心管、吸头(10 μL、200 μL、1000 μL)、灭菌双蒸水。
  二、特点:
  1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
  2.引物经过优化,特异性强。
  3.可以直接上样电泳。
  4.提供阳性对照,便于分析试验结果。
  5.特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增。
  6.重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。
  7.扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。
  三、原理:
  所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
  使用酶去标记抗原或抗体以后既不影响抗原抗体反应的特异性, 也不改变酶本身的活性,因此探针法荧光定量PCR检测试剂盒具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点,适合于大批标本的检测,广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。