泛素蛋白连接酶E1抗体

泛素蛋白连接酶E1抗体

1.特异性——免疫原

用于产生抗体的免疫原类型显着影响抗体对靶蛋白的特异性。选择针对不合适或质量差的免疫原产生的抗体将导致不可靠且可能无法重现的结果。应注意选择针对已充分表征的免疫原产生的抗体。

2.肽

合成肽免疫原很少折叠成天然蛋白质的类似三级结构。此外，除非在合成过程中添加到肽中，否则它们不会表现出任何翻译后修饰。因此，使用肽产生的抗体可用作蛋白质印迹的有用试剂，因为由于样品处理过程中的变性和还原，靶蛋白具有线性化的表位。当抗体需要区分具有高度保守氨基酸序列的两种蛋白质时，肽也可用作免疫原。在这些情况下，产生到差异区域的肽增加了制造差异抗体的可能性。

3.天然蛋白质

如果将纯化的蛋白质用作免疫原，则针对它们产生的抗体可能无法识别蛋白质印迹中变性蛋白质的线性表位。一些使用天然蛋白质产生的抗体只能识别蛋白质表面的天然氧化构象表位。对于单克隆抗体尤其如此。

The ubiquitin (Ub) pathway involves three sequential enzymatic steps that facilitate the conjugation of Ub and Ub-like molecules to specific protein substrates.

1、制备抗原。

2、选择实验动物。

3、动物免疫。

4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。

6、纯化出抗体。

7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
一）抗原制备

Ig 是免疫球蛋白，对异种动物而言，是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗 Ig 血清，

经适当提取后，产生抗 Ig 抗体，又叫第二抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中，均需制备

抗 Ig 抗体。

（二）材料与试剂

1．提取的动物 Ig

2．弗氏佐剂和弗氏不佐剂

3．实验动物 兔

4．其它材料及试剂

体外非细胞系统血红素氧合酶-2（HEME OXYGENASE-2）活性荧光定量检测试剂盒

动物糖蛋白刀豆蛋白A（ConA）树脂法纯化试剂盒

可溶性真菌/酵母细胞膜蛋白（粗提）制备试剂盒

EGFR 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒

通用型副伤A（Salmonella Paratyphi A）定性基因检测试剂盒

前列腺肿瘤CAG三联子定量试剂盒

真菌/酵母钙镁ATP酶（Ca＋＋/Mg＋＋ －ATPase）活性比色法定量

纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法

间接染色试剂盒

植物亮氨基肽酶（leucine aminopeptidase；LAP）

石蜡切片组织CDK6蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

燕麦β-葡聚糖含量化学比色法定量检测试剂盒

非同位素HRP化学发光法DNA南方杂交试剂盒

组织丙酮酸激酶（PK）总活性比色法定量检测试剂盒

植物活性线粒体分离试剂盒

真核翻译起始因子3H抗体

干扰素-gamma受体1抗体

热休克蛋白-20抗体

KIAA1881蛋白抗体

P4501B1抗体

β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体

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